偶氮甲酰胺(Azodicarbonamide，下称ADA)（分子结构式见 图1）作为食品添加剂在面粉及其制品中广泛使用，其主 要目的是用来增加面筋，改善面团流变学特性和机械加 工性能、借以增加面粉质量。目前，ADA 在美国等国广泛 应用，但在欧盟从90 年代起就禁止使用，原因是ADA 在 180℃～ 220℃温度下，半小时左右即可生成氨基脲，一 种与硝基呋喃类代谢产物一致的化合物。因此，美国食 品药品监督管理局（FDA) 规定小麦粉中的ADA 最大使用 量为0.045 g/kg，我国规定的推荐使用量为0.0l~0.02 g/kg。 目前还没有一个完善的标准方法来检测它，因此，建立 一种测定面粉中ADA 含量的液相色谱方法，从源头控制 ADA 加入量，这对加强卫生监督，保障人们的身体健康具 有重要的现实意义。
本方法通过优选色谱柱，最终确定使用WAX-1 色谱柱，以阴离子交换结合反相分离的混合模式，以磷酸盐- 乙腈洗 脱系统实现了安赛蜜色谱峰与基质成份的良好分离，无需 复杂前处理过程（简单稀释过滤即可），方法快速简便（测 试周期约为10min），灵敏度高（检测限按供试品取样量 折算可达0.8 μg/ml，而GB/T 5009.140-2003 的方法检测限为 4 μg/ml），精密度和回收率好，为食醋类样品中安赛蜜的 测定提供了较好的方法参考。
。本方法使用双三元 高效液相色谱系统（DGLC-3600），采用在线固相萃取（Online SPE）技术，首先将样品中难洗脱的动物油脂等成份保 留在富集柱上（在线净化），然后通过切换阀将易洗脱 的目标物转入分析柱进行HPLC 分离，从而有效降低基质 成份对目标物的干扰。该方法可实现样品自动化前处理， 方法快速简便（测试周期约为30 min），灵敏度高（检测 限按供试品取样量折算可达0.15 μg/kg），且精密度和回 收率好，适于大批次样品的快速检定；SPE 小柱可在分析 过程中在线净化，重复使用，大大节省测试成本。
本方法使用双三元高效液相色谱系统（DGLC-3600），以 在线固相萃取（On- line SPE）技术对样品富集分离后再进 行HPLC 检测，该方法可实现样品的自动化前处理，方法 快速简便（测试周期仅为10min），灵敏度高（检测限达 1ppm，GB/T 5009.148-2003 为2.5ppm），回收率好，适用于 大批次样品的快速检定；同时由于SPE 小柱在分析过程中 可在线净化，能够多次重复使用，从而可以大大节省测试成本
本方法根据功能饮料样品的标识含量，选取相关浓度的 标准品对VB6、烟酸和咖啡因做标准曲线，线性范围在40 倍以上，线性良好，根据标准曲线得出的数据接近饮料中 标明的浓度（咖啡因200ppm，烟酸40ppm，VB64ppm）， 通过放大谱图可以看到，目标化合物附近几乎没有任何 干扰，结果证明该方法适合饮料类样品中相关化合物的 检测。如果采用DAD 检测器进行不同时间进行不同波长 的设定，可以更有效的降低干扰。 本实验通过对相同低浓度的标准品反复进样得到该方法 的精密度数据，RSD<2.1%，又分别对同一瓶饮料里的不同 样品和不同瓶饮料里的样品进行重复性实验，RSD<1.5%， 大量数据显示Thermofisher U3000 系列液相色谱仪适合对该 类型饮料进行检测。 该方法样品仅需简单过滤后，即可直接检测。分析时间短， 26min 即可完成三种化合物的检测。
